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ELISA實驗要點:ELISA實驗總會遇到以下問題怎么辦?

更新時間:2023-07-05    點擊次數(shù):2930

  ELISA實驗要點:ELISA實驗總會遇到以下問題怎么辦?


  板內(nèi)重復(fù)性差:

  可能原因解決方法

  洗板不充分 將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分

  重復(fù)使用封板膠紙 每步均需更換使用新的封板膠紙

  未使用封板膠紙 需使用封板膠紙

  板間重復(fù)性差:

  可能原因解決方法

  洗板不充分 將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分

  確保已在洗滌前棄掉所有殘留溶液

  孵育溫度發(fā)生變化 嚴格按照推薦的溫度孵育

  勿在環(huán)境溫度變化大的地方孵育

  操作流程改變 嚴格按照相同的操作流程

  封板膠紙重復(fù)使用導(dǎo)致HRP殘留污染 每一步均使用新的封板膠紙


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  標(biāo)準(zhǔn)曲線好但樣品孔無信號:

  可能原因解決方法

  樣品中無檢測物或表達量極低 設(shè)置陽性對照

  重復(fù)實驗

  整版讀數(shù)偏低:

  可能原因解決方法

  酶標(biāo)儀波長設(shè)置不正確 檢查酶標(biāo)儀參數(shù)設(shè)置

  包被的酶標(biāo)板超過使用效期 更換新批次試劑盒

  邊緣效應(yīng):

  可能原因解決方法

  孵育溫度不均衡 孵育時使用封板膠紙

  勿在環(huán)境溫度變化大的地方孵育

  顯色緩慢:

  可能原因解決方法

  酶標(biāo)板未處于正確溫度下 確保使用前酶標(biāo)板和試劑處于室溫下

  溶液污染 避免使用含NaN3的試劑

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